Pruebas de laboratorio

Determinación del Rh

Objetivo:

Observar la presencia o ausencia de Antígeno Rh en muestras de sangre.

Material:

Suspensión de eritrocitos a investigar, al 5% en solución salina.
Suero Anti-Rh
Reactivo control negativo (albúmina bovina)
2 tubos de ensayo
2 pipetas pasteur
1 gradilla
1 pipeta volumétrica  de 1 ml.
1 solución salina al 0.85%-0.9%

Significado clínico

La aglutinación positiva indica una sangre Rh positiva, en el caso contrario se deberá hacer la prueba de Du para asegurar que sea Rh negativo.

Procedimiento

1.- Márquese dos tubos; como tubo Rh y como tubo C (control) respectivamente.

2.- Agregar al tubo Rh, 1 gota de suero anti-D y 1 gota de eritrocitos a investigar al 5%

3.- Al tubo C agregar 1 gota de reactivo control negativo o albúmina bovina al 6-8%  y 1 gota de eritrocitos a investigar al 5%-

4.- Mezclar los contenidos de cada tubo, con suavidad y centrifugar.

5.- Desprender con cuidado el botón de eritrocitos del fondo del tubo y observar si se ha producido o no una aglutinación.

Detección del factor Du (solo si el Rh es negativo o dudoso)

Fundamento
Esta prueba se aplica cuando el Rh es negativo o dudoso en la prueba de Antígeno D. El Rh está compuesto por varios determinantes antigénicos (C, D, E, c, d, e) siendo el D el que da una mejor reacción. Para facilitar la aglutinación se agrega suero de Coombs para detectar estos antígenos ya que reaccionan débilmente.

Material:

Suspensión de eritrocitos a investigar, al 5% en solución salina.

Suero Anti-Rh

Reactivo control negativo (albúmina bovina)

2 tubos de ensayo

2 pipetas pasteur

1 gradilla

1 pipeta volumétrica de 1 ml.

1 solución salina al 0.85%-0.9%

Suero de Coombs

Significado clínico

Si existe aglutinación en el tubo con anti-D, la sangre es de la variedad Du y es Rh positiva; El tubo con albúmina es el control negativo y no debe existir aglutinación. Si ambos tubos no presentan aglutinación, la sangre es Rh negativa.

Procedimiento

1.- Mezclar los contenidos de cada tubo, con suavidad y centrifugar.

2.- Desprender con cuidado el botón de eritrocitos del fondo del tubo y proseguir como se indica a continuación.

3.- Incubar ambos tubos a 37°C durante 15 minutos.

4.- Lavar 3 veces con SSF

5.- Después de decantar y secar bien los bordes de los tubos, agregar a cada tubo dos gotas de suero de Coombs

6.- Centrifugar a 2.000 rpm 1 minuto y observar si existe aglutinación moviendo el botón